供应武汉呋喃唑酮检测试剂盒

武汉阳达生物科技有限公司供应武汉呋喃唑酮检测试剂盒

呋喃唑酮代谢物（AOZ）ELISA检测试剂盒说明书

一、概要
呋喃唑酮（Furazolidone）（又称痢特灵），属硝基呋喃类药物，为广谱抗生素，对革兰氏阳性及阴性菌均有一定抗菌作用。由于呋喃唑酮价格低廉且治疗效果好，所以被广泛应用于家禽、家畜、水产品的痢疾、肠炎、球虫病，以及火鸡黑头病的预防和治疗。但研究证明硝基呋喃类药物及其代谢物具有相当大的毒性，有致畸胎副作用，且能诱发癌症，这引起了人们高度重视。
1990年7月欧盟颁布2377/90/EEC条例，将硝基呋喃类药物及其代谢产物列为A类禁用药物，我国农业部文件:农牧发[2002]1号规定食品性动物中呋喃唑酮为不得检出。
本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被呋喃唑酮代谢物抗原，样本残留的呋喃唑酮代谢物和微孔条上预包被的抗原竞争抗呋喃唑酮代谢物抗体,加入TMB底物显色，样本吸光度值与其残留物呋喃唑酮代谢物呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中呋喃唑酮代谢物的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测动物组织（鸡、猪），蜂蜜，鱼虾类和鸡蛋样本中的呋喃唑酮代谢物的残留量。
四、检测步骤
测定前应须知：
1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温（20～25℃）。
2、使用之后立即将所有试剂放回2～8℃。
3、在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。
4、在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。
操作步骤：
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5 加标准品/样本：加标准品/样本50ml/孔到对应的微孔中，然后加入抗试剂50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。
6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液250ml/孔，充分洗涤4－5次，每次间隔10s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
7、加酶标物：加入酶标物100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min，取出重复洗板步骤6。
8、显色：加入底物液A液50ml/孔，再加底物液B液50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应20～30min。
9、测定：加入终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。
五、 结果判定
结果判定有两种方法，粗略判定可用第1种方法，而定量判定用第2种方法。注意样本吸光值与其所含呋喃唑酮代谢物成负相关。
1、用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围(ppb)。假设样本1的吸光度值为0.569，样本2的吸光度值为1.725，标准液吸光度值分别是：0ppb为2.523；0.05ppb为2.217；0.15ppb为1.566；0.45ppb为0.842；1.35ppb为0.387；4.05ppb为0.145。则样本1的浓度范围是0.45ppb～1.35ppb；样本2的浓度范围是0.05ppb～0.15ppb，再乘以其对应的稀释倍数即可得出样本中呋喃唑酮代谢物的浓度范围。

六、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度：0.05ppb
样本最低检测限：
组织……………………………………………0.1ppb
回收率：
肌肉、肝脏组织 ……………………………… 75±15%
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%




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