武汉阳达生物科技有限公司供应武汉盐酸克伦特罗检测试剂盒
克仑特罗(Clenbuterol)ELISA检测试剂盒说明书
一、概要
克仑特罗（Clenbuterol）属于β-兴奋剂，近年来被非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长，因其添加剂量是治疗剂量的5-10倍，以至于在动物体内残留量高而给消费者带来危害。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点，操作时间仅需30min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的克仑特罗和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗克仑特罗抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含残留物克仑特罗的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中克仑特罗的含量。
可定性、定量检测动物尿液等样品中克仑特罗的残留量。
三、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度：0.1ppb
样本最低检测限：
尿液、血清………………………………… 0.1ppb
组织
方法（a） …………………………………… 0.1ppb
方法（b） …………………………………… 0.4ppb
高脂肪组织………………………………… 0.1ppb
饲料………………………………………………10ppb
准确度：
尿液、血清 …………………………………93±15%
组织 …………………………………………75±10%
饲料 …………………………………………94±15%
精密度：
试剂盒的变异系数均小于10%
四、交叉反应率
克仑特罗……………………………………………100%
沙丁胺醇……………………………………………4.0%
特布它林………………………………………小于1.9%
莱克多巴胺……………………………………小于0.1%
福英特罗…………………………………………小于1%
盐酸肾上腺素…………………………………小于0.1%
盐酸麻黄碱………………………………………小于1%
多巴酚丁胺……………………………………小于0.1%
沙美特罗…………………………………………小于1%
操作步骤：
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20-25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本：加入标准品/样本20?l 到对应的微孔中，再加入酶标二抗60?l/孔，最后加入抗体工作液60?l/孔,置25℃避光环境中反应20min。
6、洗板：小心揭开盖板盖，将孔内液体甩干，用洗涤工作液250?l/孔，充分洗涤4次（注：第一次加洗涤液若是从A1孔加到A12孔, 那下次加洗涤液的顺序就反过来，从A12孔加到A1孔），每次间隔10s，4次洗涤液加完后，用吸水纸拍干。（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头戳破）。
7、显色：先把底物液A液与底物液B液等体积混合后，加入显色混合液100?l/孔，用盖板盖盖板后，置25℃避光环境中反应10min（见注意事项8）。
9、测定：加入终止液50?l/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)
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