武汉阳达生物科技有限公司供应武汉氯霉素ELISA检测试剂盒
氯霉素(Chloramphenicol)ELISA检测试剂盒
一、概要
氯霉素 (Chloramphenicol, CAP)曾是应用广泛的抗菌素,但由于其存在严重的副作用,能引起人的再生障碍性贫血,粒细胞缺乏症等疾病, 欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,操作时间仅需60min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用直接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被氯霉素抗体,样本中残留的氯霉素和酶标氯霉素抗原竞争微孔条上预包被的抗体,用TMB底物显色,样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中氯霉素的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测动物组织、牛奶、蜂蜜、饲料、鸡蛋等样本中氯霉素的残留量。
四、交叉反应率
氯霉素………………………………………………100%
氯霉素碱……………………………………………0.5%
甲基氯霉素………………………………………≤0.05%
氟苯尼考…………………………………………<0.01%
氟苯尼考胺…………………………………………<0.1%
四环素、庆大霉素及氨苄青霉素未显现任何交叉反应。
五、检测步骤
测定前应须知:
1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温(20~25℃)。
2、使用之后立即将所有试剂放回2~8℃。
3、在ELISA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性,正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。
4、在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖板膜封住微孔板。
操作步骤:
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入自封袋,保存于2~8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品/样本70ml到对应的微孔中,再加入酶标氯霉素30ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液300ml/孔,充分洗涤5次,每次间隔30s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液A液50ml/孔,再加底物液B液50ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境反应20~30min。
8、测定:加入终止液50ml/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。
七、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度:0.05ppb
样本最低检测限:
组织样品………………………………0.025ppb
牛奶………………………………………0.05ppb
饲料…………………………………………0.2ppb
蛋…………………………………………………0.05ppb
蜂蜜………………………………………………0.05ppb
回收率:
组织样品……………………………………… 102±15%
牛奶…………………………………………… 110±10%
饲料………………………………………………93±10%
蛋…………………………………………………95±15%
蜂蜜………………………………………………80±10%
精密度:
试剂盒的变异系数均小于10%
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