武汉阳达生物科技有限公司供应武汉猪瘟病毒IgG抗体检测ELISA试剂盒
猪瘟病毒IgG抗体检测ELISA试剂盒使用说明书
【名 称】
通用名:猪瘟病毒IgG抗体检测ELISA试剂盒使用说明书
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Classical swine fever (ELISA)
【原 理】
本品系由包被猪瘟病毒E2抗原的微孔板和酶标记抗猪IgG及其他试剂组成,应用酶免间接法原理(ELISA)检测猪血清或血浆中猪瘟 IgG抗体。
【使用意义】
猪瘟病毒(CSFV)是目前危害国内养猪业一种高发病率、高死亡率和高度接触传染的病毒。
在猪的预防免疫工作中,最值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。在过高的抗体水平进行免疫,过高的抗体水平还会中和疫苗,影响疫苗的免疫效果,导致免疫失败;在较低的抗体水平进行免疫,又会出现抗体保护真空期,威胁猪的健康。该试剂盒检测反映抗体水平,利于指导免疫时机。
【试剂盒组成】
【使用方法】
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl;样品孔每孔先加样品稀释液90μl,再加样品10ul(或样本1:10稀释后加100μl);空白对照孔不加。
4. 混匀,置37℃温浴30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置60秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。
7. 置37℃温浴30分钟。
8. 洗涤,同步骤5。
9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
10. 每孔加终止液50μl,混匀,置酶标仪450nm处测各孔A值(建议用双波长450nm、630nm)。
【结果判定】
1. 阴性对照:正常情况下,阴性对照孔A值≤0.1;
2. 阳性对照:正常情况下,阳性对照孔A值≥0.4;
3. 临界值(C.O.)的计算:临界值=0.15+阴性对照孔均值;所有阴性、阳性对照和样品的A值均须减去空白平均值后作为计算值;阴性对照孔A值大于0.10时应舍弃,如所有阴性对照孔A值都大于0.10时须重复实验;阴性对照孔低于0.05时以0.05计算。
4. 结果判定:检测标本A450值≥临界值判定为本试验阳性;检测标本A450值<临界值判定为阴性。
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